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植物組織培養(yǎng)外植體的選擇
發(fā)表時(shí)間:2018-5-23 17:41:26 閱讀:2408

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植物組織培養(yǎng)的外植體是指從植株切割下的一個(gè)器官或者組織。是植物組織培養(yǎng)工作的第一步。根據(jù)培養(yǎng)方法、培養(yǎng)目的和植物本身的物種特性,外植體有不同的采集方法,正確的選擇外植體對(duì)組培能否成功的影響很大。外植體的選擇主要應(yīng)注意以下幾個(gè)問題:

  1. 選擇優(yōu)良的種質(zhì)

    無論是科學(xué)研究還是商業(yè)化脫毒快繁,優(yōu)良的種質(zhì)是成功的第一步。通常選擇具有明確的種性特征,種質(zhì)純度高,無雜合現(xiàn)象的植株作為取材植株。同時(shí)還應(yīng)該觀察其遺傳穩(wěn)定性、花色、果型、長勢(shì)等性狀表現(xiàn)。

  2. 選擇健壯的植株

    應(yīng)在長勢(shì)健壯且無病蟲害的植株上選擇正常發(fā)育的器官或者組織作為外植體材料。這些器官或者組織的代謝旺盛,再生能力強(qiáng),接種后更加容易培養(yǎng)成功。

  3. 選擇合適的部位

    雖然根據(jù)細(xì)胞全能性理論上來講任何組織或者器官都有潛能發(fā)育成一個(gè)完整的植株,但是從實(shí)際操作的過程中會(huì)發(fā)現(xiàn)不同種類的植株以及同一種類不同取材部位的器官或組織對(duì)誘導(dǎo)條件的反應(yīng)是有很大差異的。如百合科植物風(fēng)信子、虎眼萬年青等比較容易形成再生小植株,而郁金香就比較困難。百合鱗莖的鱗片外層比內(nèi)層的再生能力強(qiáng),下段比中、上段再生能力強(qiáng)。因此選取材料時(shí)要對(duì)所培養(yǎng)植物各部位的誘導(dǎo)及分化能力進(jìn)行比較,從中篩選出合適的、最易表達(dá)全能性的部位作為為植體。

     莖尖部位:莖尖不僅生長速度快,繁殖率高,不容易發(fā)生變異,而且莖尖培養(yǎng)是獲得脫毒苗木的有效途徑。因此莖尖是植物組織培養(yǎng)中最常用的外植體。

     節(jié)間部位:大部分果樹和花卉等植物,新梢的節(jié)間部是組織培養(yǎng)的較好材料。新梢節(jié)間部位不僅消毒容易,而且脫分化和再分化能力較強(qiáng),因此是常用組織培養(yǎng)材料。

     葉和葉柄:葉片和葉柄取材容易,新出的葉片雜菌較少,實(shí)驗(yàn)操作方便,是植物組織培養(yǎng)中常用的材料。尤其是近年在植物的遺傳轉(zhuǎn)化中,以葉片為試驗(yàn)材料的報(bào)道很多。

     鱗片:水仙、百合、蔥、蒜、風(fēng)信子等鱗莖類植物常以鱗片為材料。

  4. 取材季節(jié)

    對(duì)于大多數(shù)植物來講,應(yīng)在其生長季節(jié)開始取材,在生長末期及休眠期應(yīng)該采取措施打破休眠后取材,更容易成功。如:花藥培養(yǎng)應(yīng)在花粉發(fā)育到單核靠邊期取材,這時(shí)比較容易形成愈傷組織。百合在春夏季采集的鱗莖、片,在不加生長素的培養(yǎng)基中,可自由地生長、分化;而其他季節(jié)則不能。葉子花的腋芽培養(yǎng),如果在1月至翌年2月間采集,則腋芽萌發(fā)非常遲緩;而在3-8月間采集,萌發(fā)的數(shù)目多,萌發(fā)速度快。

  5. 材料的生理狀態(tài)和發(fā)育年齡

    一般情況下認(rèn)為幼年組織比老年組織具有較高的形態(tài)發(fā)生能力。隨著組織年齡的增加,器官的再生能力會(huì)逐漸減弱甚至完全消失。

  6. 合適的大小

    培養(yǎng)材料的大小根據(jù)植物種類、器官和目的來確定。通常情況下,快速繁殖時(shí)葉片、花瓣等面積為5mm2,其他培養(yǎng)材料的大小為0.5~1.0cm。如果是胚胎培養(yǎng)或脫毒培養(yǎng)的材料,則應(yīng)更小。材料太大,不易徹底消毒,污染率高;材料太小,多形成愈傷組織,甚至難以成活。


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